FATORES DE TRANSCRIÇÃO RELACIONADOS A REGULAÇÃO DA EXPRESSÃO GÊNICA ATRAVÉS DO RECEPTOR DE PROGESTERONA NO DIESTRO NÃO GESTACIONAL DE CADELAS

16 set    Agrárias (2020)

Francislaine Anelize Garcia Santos, Arnaldo Shindi Maruyama, Luiz Antonio Berto Gomes, Paula de Carvalho Papa

https://youtu.be/4KoIle1BDs8

O corpo lúteo (CL) é uma glândula endócrina essencial para a manutenção da prenhez e ciclicidade de cadelas, o aumento das concentrações periféricas de progesterona (P4) é um indicativo da formação do CL. A P4 é capaz de ativar receptores de progesterona (PGRs), que podem interagir com fatores de transcrição para modular a atividade transcricional sobre regiões promotoras de genes responsivos à P4. O objetivo do trabalho foi caracterizar a expressão de fatores de transcrição com sítios de ligação no PGR durante o diestro canino através da técnica de sequenciamento de RNA (RNA-Seq). Após aprovação do CEUA-FMVZ-USP (nº 4441110716/2016), foram utilizados 18 CLs provenientes de cadelas que passaram por ovariosalpingohisterectomia nos dias 10, 20, 30, 40, 50 e 60 após a ovulação (p.o). Os CLs coletados foram utilizados para extração de RNA total a partir do protocolo de TRIZOL e análise por RNA-Seq seguindo o protocolo TruSeq RNA Sample Preparation. Os resultados do RNA-Seq foram analisados em valores de fold-change maiores que 1 e menores que 1, indicaram maior e menor expressão gênica, respectivamente. Através do software oPOSSUM 3.0 foram identificados 17 fatores de transcrição com sítios de ligação mais representados no PGR. As análises de expressão gênica do RNA-Seq identificaram 08 fatores de transcrição nos CLs de cadelas não prenhes e apenas os fatores de transcrição AP1 e HOXA5 foram identificados como diferencialmente expressos em valores de fold-change. O PGR mostrou maior expressão no dia 10 em comparação aos dias 30, 40 e 60 p.o (fold-change: 1.02, 1.03 e 1.02, respectivamente), a expressão gênica de AP1 foi maior no dia 30 em comparação ao dia 50 p.o (fold-change: 1.04) e a expressão gênica de HOXA5 foi menor no dia 20 em comparação ao dia 40 p.o (fold-change: -1.04). O aumento do PGR no dia 10 p.o pode ser um indicativo de sua participação no período de formação do CL, assim como o aumento de AP1 no dia 30 p.o mostra um papel no controle da proliferação do CL canino. O aumento da expressão de HOXA5 no dia 40 p.o, sugere uma implicação no processo de regressão do CL canino como regulador negativo do PGR, uma vez que foi evidenciado em processos de regulação da proliferação celular, apoptose e atividade da caspase-3. Diante desses dados, consideramos que o PGR é responsivo a fatores de transcrição nos CLs de cadelas não prenhes e podem exercer papel na regulação da proliferação e sobrevivência celular do CL durante o diestro. Órgão de fomento financiador da pesquisa: FAPESP e CAPES Protocolo CEUA: 44411.

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